MSM 처리 Rt-pcr

MSM 처리 및 처리되지 않은 셀 모두에 대한 Rt-pcr

312 및 522bp의 증폭된 제품, 이는 다음과 같습니다.
VEGF와 IGF-1R mRNA.igf-1r과 vegf는 각각
유전자별 프라이머를 사용하여 증폭됩니다. igf1r과 vegf의 발현 모두 용량 의존적인 방식으로 다음과 같이 하향 조정되었다.
MSM(그림 3). 18S 표현(제어)은 MSM의 영향을 받지 않았다.
집중을 불문하고
MSM이 STAT5의 IGF-1R에 대한 결합
VEGF 프로모터 사이트에 대한 STAT3
MSM은 STAT5를 IGF-1R 사이트에 바인딩하는 것을 금지했고
STAT3가 VEGF 프로모터 사이트에 구속되지 않습니다. MDMAMB 231 세포는 300 mMMSM으로 처리되었다.
그림 4A, 300이 있는 곳에서 DNA 결합 활동은 발견되지 않았다.
mMMSM. 핵 추출물이 pSTAT5의 감소된 수준을 보였다(그림 4C). 따라서 MSM은 인산화를 억제하였다.
STAT5b 상위 p-STAT5이며, IGF1R의 추진 사이트에 바인딩되어 있습니다. 더욱이, VEGF 프로모터에 대한 STAT3의 구속력 감소
사이트가 탐지되었습니다(그림 4B). 표현 수준이 매우 낮습니다.
STAT3(그림 4C). 그림 4C는 다음과 같은 표현을 보여 줍니다.
두드러진 전이 수용체 VEGF-R2는 종양 억제 단백질 p53의 발현에 비해 거의 완전히 차단되었다.
BRCA-1은 유지되었다.
MSM 억제 STAT5b/IGF-1R, STAT5b/HSP90a 및
STAT3/VEGF 프로모터 활동
MSM의 STAT3 중재적 활성화 참여
VEGF 프로모터는 STAT3-부족한 셀을 사용하여 검사되었습니다.
COS-7 라인입니다. MSM이 STAT5b/에 미치는 전사적 영향
IGF-1R, STAT5b/HSP90a 및 STAT3/VEGF는 루시퍼레이즈 리포터 분석을 통해 결정되었다. 그림 5A, B, C는 다음을 보여준다.

STAT5b/IGF-1R, STAT5b/의 상대적 루시퍼레이즈 활동

HSP90a 및 STAT3/VEGF. MSM 24시간 후
(300 mM) 치료, 상대적인 루시퍼레이즈 활성이 감소되고
STAT5b/IGF-1R에 대해 통계적으로 유의한 것으로 확인되었다.
STAT5b/HSP90a 및 STAT3/VEGF(***P,0.001)입니다. 이것들
결과는 STAT5b가 IGF-1R의 중요한 중재자임을 시사한다.
STAT3는 VEGF 경로이다. 또한 중요한 사항도 확인할 수 있습니다.
STAT5band의 프로모터 활동을 억제하는 MSM의 역할
STAT3, STAT5b 및 STAT3 신호 전달을 금지합니다.
계단식 계단식
전이성 인체의 MSM 유도 이동 억제
유방암 세포
세포독성 연구에 따르면, 우리는 IC50을 확인했다.
300 mM(그림 1A)의 MSM 용량. 최대값을 얻기 위해
생존 가능한 세포의 수, 우리는 MSM의 농도를 줄였다.
200 mM. 이 농도에서는 MSM이 세포독성을 유도하여
MDA-MB 231 셀의 30%, MDA-MB 231 셀의 70%
실행 가능한 상태로 유지됨(데이터가 표시되지 않음). 이것은 우리에게 기회를 주었다.
MSM의 작용을 해독하다. 실시간 세포 비디오 현미경
전이성 유방암 세포가 200mM에서
MSM이 인접한 전이 레이어를 통한 마이그레이션을 중지했습니다.
살아있는 세포 현미경은 또한 높은 형태학적인 것을 보여주었다.
72시간 연속 배양 시 제어 세포의 변화
매 24시간마다 매체를 변화시키죠 72시간 배양 후
날카로운 손가락 모양의 구조로 바뀐 제어 세포의 형태학이다.